Укр
Рус
Як обрати центрифугу
Центрифуга – це невід’ємна складова частина будь-якої лабораторії. При виборі центрифуги слід пам’ятати, що це довготривала інвестиція і ...
08.12.2020 / 18:33НАЛЕЖНЕ ЗАМОРОЖУВАННЯ ПЛАЗМИ
Чому слід заморожувати плазму якнайшвидше? Як відбувається заморожування плазми? Що впливає на зниження концентрації білків плазми?
Сучасні стандарти клінічної та виробничої трансфузіології вимагають постійного підвищення якості та ефективності компонентів і препаратів донорської крові. Одним з таких підходів є сувора необхідність дотримання холодового ланцюга. Відомо, що в звичайних умовах після розморожування плазми вміст термолабільних білків крові, таких як фактор згортання крові, зменшується до 80% від первинної концентрації.
Чому слід заморожувати плазму якнайшвидше?
Якщо плазма заморожується неналежним чином, або через великий проміжок часу після забору, то вміст фактору VIII може знизитися майже до 50% у розмороженій плазмі у порівнянні з свіжою. З цієї причини, незважаючи на рекомендації заморожувати плазму не пізніше 6 годин, в спеціальних заморожувачах, треба проводити заморозку якнайшвидше, відразу після взяття і, головне, в належному заморожувачі.
Це важливо з багатьох причин. Переливання пацієнтам неналежно замороженої та розмороженої плазми вимагає іноді в 2 рази більших об’ємів для досягнення того самого ефекту. Це призводить до більшої імунізації пацієнтів, підвищує ризик передачі вірусних хвороб з залишковими лейкоцитами та їх уламками, збільшує вартість лікування в цілому, викликає післятрансфузійні реакції; знижує якість лікування.
Переробка на препарати плазми з низьким титром термолабільних білків стає лікувально та економічно невигідною. В результаті через недоотримання кількості білків того ж фактору VIII підвищується загальна собівартість всіх препаратів, знижується рентабельність виробництва, що на конкурентному ринку принципово.
З цієї причини, належну заморозку плазми можна вважати найважливішим кроком в процесі використання свіжозамороженої плазми, який відповідає за отримання біологічно високоповноцінної свіжозамороженої плазми. Навіть назва цього компонента містить слово свіжа, тобто та плазма, що заморожена безпосередньо після взяття.
Центри крові на сьогодні теж знаходяться в умовах конкурентного ринку і вже відомо коли лікарні, спробував плазму іншого виробника, відмовлялись від послуг одного постачальника і переходили на іншого. Найчастіше це відбувалось, коли лікарі вочевидь бачили, що плазми від нового постачальника потрібно вдвічі менше.
Як відбувається заморозка плазми?
Перед тим як обирати заморожувач, треба розуміти процеси, які відбуваються при цьому. Після отримання плазми відразу починається зниження концентрації багатьох білків. З цієї причини її треба заморозити якнайшвидше і рівномірно по всій площі пакету, бо в цьому стані всі хімічні процеси, у тому числі і руйнування білків, майже зупиняються. Охолодження плазми відбувається рівномірно до температури замерзання, яка сягає для плазми близько -0,540С, через те що вона містить крім води близько 9% інших речовин. Саме цей вміст стає причиною того, що процес зміни агрегатного стану плазми значно відрізняється від чистої води.
Враховуючи те, що процес охолодження, звичайно ж, відбувається ззовні контейнера з плазмою, то замороження починається саме з зовнішніх шарів плазми. Треба відмітити, що вода має одну з найбільших теплоємностей в природі і, відповідно, швидкість її охолодження невелика. Але найголовніше, що на сам процес замерзання, тобто перехід води через точку замерзання, витрачається енергії набагато більше ніж на попереднє охолодження. З цієї причини типовий графік заморозки має таку форму.
Саме під час "плато", яке можна побачити в центрі графіку відбуваються основні процеси, що призводять до зниження якості свіжозамороженої плазми.
Що впливає на зниження концентрації білків плазми?
Під час заморозки з'являється чистий лід в багатьох локаціях – центрах кристалізації, а речовини, що містяться у плазмі, концентрується в воді, що залишається. Це викликає рух молекул в загальній масі плазми – дифузію за градієнтом концентрації. При низькій швидкості заморожування дифузія регулюється виключно швидкістю появи льоду. В результаті всі розчинені компоненти концентрується в центрі контейнеру з плазмою. При цьому рух всіх розчинених речовин відбувається синхронно і чим більший шар плазми (навіть при розміщенні контейнеру вертикально у порівнянні з горизонтальним), тим концентрація вище.
Це призводить до того, що такі молекули як фактору VIII тривалий час взаємодіють з високими концентраціями солей, що їх інактивують. При високій швидкості заморожування кристали льоду в просторі мішка з'являються набагато швидше, ніж відбувається рух речовин. В результаті осередки концентрованих солей розподіляються рівномірно по всій масі плазми і не відбувається тривалого їх впливу на білки плазми. Інший фактор, що впливає на зниження концентрації білків плазми - це руйнування білків при кристалізації води. Відомо, що об'єм льоду набагато більше об'єму води, з якої він отриманий. Різниця сягає 9%. Це призводить до того, що плазма збільшується при замерзанні по всьому об'єму в той самий час, як аморфна, рідка вода переходить в кристалічний лід. Це сприяє значному зсуву на молекулярному рівні і може пошкодити великі молекули, такі як білки. Вихід один - максимально прискорити цей процес, щоб знизити час негативного впливу. І це є другою причиною нагальної необхідності швидкозаморожувачів, які при належній конструкції і використанні можуть забезпечити суттєве підвищення якості плазми. Так, вміст фактору VIII може сягати більше ніж 90% від первинного.
Таким чином, враховуючи фізичну природу води, яка є основою плазми крові людини, необхідно приділяти заморожуванню плазми особливу увагу. Саме цей процес в загальному холодовому ланцюгу є найбільш критичним і впливовим на кінцеву якість продукту. Наявність в плазмі великої кількості розчинених речовин, які принципово різні за своєю природою і здатні значно впливати один на одного, вимагає використання систем, що мінімізують вплив заморозки. Важливим є те, що встановлювати таку систему потрібно безпосередньо в пункті забору плазми, а у разі забору на виїзді розрахувати час тимчасового зберігання, доставки, щоб уникнути використання плазми, де вже до моменту заморожування відбулося руйнування термолабільних факторів та почались безповоротні реакції.
НН Медичний інститут СумДУ
Курс «Актуальні питання гематології та трансфузіології»
к.м.н., Любчак В.В.